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Clonage et sous-clonage par PCR

Temps de mise à jour : 2020-08-10

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Clonage et sous-clonage par PCR

La technologie de clonage moléculaire est une technologie développée dans les années 1970. Elle est maintenant devenue une technologie largement utilisée en biologie moléculaire.

Son émergence a donné aux gens plus de possibilités de comprendre et de modifier les gènes, et est utile pour l'agriculture, l'industrie et la médecine ont eu un impact révolutionnaire, tout en apportant de nouvelles solutions aux crises énergétique, alimentaire et environnementale auxquelles le monde est confronté.


Clonage PCR :
La technologie de clonage par PCR est similaire au processus de réplication naturelle de l'ADN et consiste en trois étapes de réaction de base: dénaturation-annelage-extension. Les amorces sont conçues selon des séquences connues pour obtenir des fragments cibles à partir du génome. L'obtention du gène cible par la technologie de clonage par PCR est l'un des processus importants du clonage d'ADN.


Sous-clonage:

La technologie de sous-clonage signifie que les fragments d'ADN étrangers dans le clonage initial sont relativement volumineux et qu'il existe de nombreux fragments autres que le gène cible.

Afin d'analyser davantage l'ADN cible ou de le recombiner, reclonez les fragments d'ADN cible qui ont été obtenus.

Ce processus s'appelle le sous-clonage. Le processus de base du sous-clonage comprend le criblage des fragments cibles, la préparation de vecteurs de clonage, le transfert des produits de ligature dans les cellules et le criblage des recombinants.



Qu'il s'agisse de technologie de clonage par PCR ou de technologie de sous-clonage, il utilise la technologie de recombinaison pour insérer le gène cible obtenu dans un vecteur in vitro pour former un vecteur recombiné, qui pénètre ensuite dans le corps hôte par la méthode de transduction / transformation, et donc dans le corps hôte. réplication et amplification du gène, et enfin obtenir le vecteur de clonage contenant le gène cible grâce à la méthode de criblage, et réaliser la purification et l'amplification des fragments d'ADN au niveau moléculaire.

Biosystèmes généraux   dispose d'une plate-forme de synthèse de gène brevetée, qui peut fournir des services à guichet unique, de la synthèse de gènes et de la construction de vecteurs au clonage et au sous-clonage par PCR.

Selon le modèle de clonage et la séquence fournis par le client, les amorces d'amplification sont conçues pour cloner le produit de PCR du segment cible dans Le nouveau vecteur est placé sur un site spécifique et une vérification séquencée est effectuée pour fournir aux clients des services de sous-clonage précis et rapides.