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Avantages du système d'expression de protéines sans cellules

Temps de mise à jour : 2021-01-12

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Avantages du système d'expression de protéines sans cellules

Par rapport à l'expression de protéines cellulaires , les systèmes d'expression de protéines sans cellules présentent plusieurs avantages distincts, notamment une production globale accrue de protéines complètes fonctionnelles et solubles, et un gain de temps significatif. Une méthode in vivo typique peut prendre jusqu'à quelques jours ou même le pire moment pour se terminer. En revanche, la réaction de traduction in vitro, y compris le temps nécessaire à la préparation de l'extrait, peut être achevée en quelques heures seulement, offrant ainsi le meilleur lien entre le phénotype (fonction de la protéine exprimée) et le génotype. Manière rapide.


En utilisant une méthode sans cellule, la synthèse des protéines est également universelle car elle peut être réalisée en utilisant plusieurs entrées. Les systèmes de traduction sans cellule utilisent l'ARNm comme matrice, tandis que l'ADN plasmidique ou les fragments de PCR linéaire peuvent agir comme modèles d'ADN dans un système de transcription / traduction couplé.

Advantages of cell-free protein expression system


Un autre avantage du CFPS est qu'il s'agit d'une réponse ouverte. Étant donné que l'expression de protéines non cellulaires n'est pas restreinte par la paroi cellulaire, il existe de nombreuses possibilités de contrôler directement l'environnement chimique, permettant l'ajout de composants externes et de molécules, créant ainsi des conditions plus propices au repliement et à l'activité des protéines. Le format CFPS permet une surveillance active, un échantillonnage et un dépistage rapides sans avoir besoin d'étapes de clonage de gène.


Puisqu'il n'y a pas de barrières cellulaires qui peuvent limiter le contrôle de la traduction, le système CFPS est également une méthode idéale pour synthétiser des protéines, qui sont traditionnellement difficiles à exprimer et à analyser par la suite.


Lorsqu'il n'y a pas de métabolisme cellulaire interne ou de voies biochimiques pour contrebalancer, les protéines membranaires, les protéines virales, les protéines toxiques et les protéines qui subissent une dégradation protéolytique rapide par des processus intracellulaires peuvent également être exprimées plus facilement. Par conséquent, les préoccupations concernant la toxicité potentielle de la protéine du produit sont atténuées.


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